1. 样品准备:收集血液样本,离心分离血清或血浆,并按照试剂盒的说明进行适当的稀释或处理。
2. 标准曲线建立:使用试剂盒提供的标准品,按照的浓度梯度进行稀释,以建立吸光度与浓度的关系曲线。
3. 预处理:可能需要对样品进行预处理,例如去除蛋白质或去除其他可能干扰检测的成分。
4. 样品和标准品加载:将样品和标准品加载到预包被有抗体的微孔板中。
5. 孵育:在一定温度和时间下让样本和抗体结合。
6. 洗涤:使用洗板机或手动清洗微孔板,去除未结合的物质。
7. 添加酶标记的抗体:加入标记了酶的抗体,使其与步结合的抗原结合。
8. 再次孵育:允许酶标记的抗体与抗原结合。
9. 洗涤:再次清洗微孔板以去除未结合的酶标记抗体。
10. 添加底物溶液:加入底物,底物在酶的作用下会发生颜色变化。
11. 孵育:让反应进行到一定时间,颜色变化达到稳定。
12. 终止反应:加入终止液,停止颜色变化。
13. 读取吸光度:使用酶标仪或微孔板读取器在波长下测量每个孔的吸光度。
14. 数据分析:根据标准曲线计算ucOC的浓度。
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