大鼠β1整合素(ITG-β1)elisa试剂盒
使用说明书
大鼠β1整合素(ITG-β1)elisa试剂盒检测原理:
大鼠β1整合素(ITG-β1)elisa试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被微囊藻毒素LR(MC-LR)抗体的包被微孔中,依次
加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻-底洗涤。用底物TMB显色,TMB在化物酶的催化下转化成蓝
色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的微囊藻毒素LR(MC-LR)呈正相关。用酶标仪在450m波长
下测定吸光度(0D值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1.样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根化物酶(HRP)的剂。
2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行。
3.植物萃取液或其它相关样本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测。
4.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分
解冻。
自备物品:
*移液器和移液头**:用于量取液体,确保移液头与实验需求匹配。
**微量离心机**:用于样本的离心处理。
**恒温水浴或孵育器**:控制孵育温度,通常是37°C。
**洗板机**:用于清洗微孔板,减少非特结合。
**酶标仪**:测量吸光值,通常在450nm或其他波长。
**振荡器**:混合溶液,确保成分均匀。
**微量滴定管和量筒**:用于较大体积液体的转移。
**冷藏设备**:保持某些试剂在合适的低温环境中。
**实验室记事本和笔**:记录实验步骤和数据。
**防护装备**:实验服、手套、护目镜等,保护实验者安全。
**标准曲线绘制工具**:如Excel或其他数据分析软件,用于处理数据和绘制标准曲线。
**样本处理设备**:如离心机、匀浆器(视样本类型而定)。
**计时器**:确保每个步骤的时间准确。
在开始实验前,确保所有设备已校准,试剂新鲜且在有效期内,同时遵循实验室的安全规程。如果实验涉及生物样本,还需遵守生物安全规定
操作注意事项:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司 的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
试剂的准备:
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法:
1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1mi后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2.自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步紧:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加人辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴
锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1in,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50uL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的0D值。
结果判断
绘制标准曲线:在Ec工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应0D值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算
各样本浓度值。
试剂盒性能:
安全性
1)避免直接接触停止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请赶快用水冲刷。
2)实验中不要吃喝、抽烟或运用化妆品。
3)不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2.灵敏度:最-低检测浓度小于1.0ng儿。
3.特:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6.有效期:6个月
**免责声明**
本ELISA试剂盒仅供科学研究使用,不适用于临床诊断或决策。用户在使用本产品时应具备相关的实验技能和知识,。在开始实验前,请仔细阅读并理解产品说明书和此免责声明。
相关产品推荐:
KKX-10380F 鱼酪蛋白激酶2(CK2)elisa试剂盒 FISH casein kinase2 ELISA Kit 0.3125-10ng/ml 酪蛋白激酶2 CK2
KKX-10032F 鱼化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)elisa试剂盒 FISH Peroxisome Proliferator-activated receptor γ ELISA Kit 1.25-40pg/mL 化物酶体增殖因子活化受体γ PPAR-γ
KKX-10548F 鱼载脂蛋白E(apo-E)elisa试剂盒 FISH apoprotein E ELISA Kit 156.25-5000ng/mL 载脂蛋白E apo-E
KKX-10629F 鱼脂肪酸去饱和酶(FAD6)elisa试剂盒 FISH fatty acid desaturase 6 ELISA Kit 3.125-100U/L 脂肪酸去饱和酶 FAD6
KKX-10771F 鱼辅酶I(NAD)elisa试剂盒 FISH Nicotinamide Adenine Dinucleotide ELISA Kit 0.625-20U/L 辅酶I NAD
KKX-10249F 鱼维生素B5(VB5)elisa试剂盒 FISH Vitamin B5 ELISA Kit 25-800pg/mL 维生素B5 VB5
KKX-10026F 鱼亚精胺(Spermidine)elisa试剂盒 FISH Spermidine ELISA Kit 5-160pmol/mL 亚精胺 Spermidine
大鼠β1整合素(ITG-β1)elisa试剂盒大鼠β1整合素(ITG-β1)elisa试剂盒FISHglucoseoxidaseELISAKit哪里买
KKX-10611F 鱼谷氨酰胺转胺酶(TG)elisa试剂盒 FISH Transglutaminase ELISA Kit 12.5-400U/L 谷氨酰胺转胺酶 TG
KKX-10357F 鱼胡萝卜素(carotene)elisa试剂盒 FISH carotene ELISA Kit 0.25-8μg/mL 胡萝卜素 carotene
KKX-10077F 鱼超敏C反应蛋白(hs-CRP)elisa试剂盒 FISH high sensitivity C-Reactive Protein ELISA Kit 3.75-120ng/mL 超敏C反应蛋白 hs-CRP
KKX-10699F 鱼糖原合成酶激酶3β(GSK3β)elisa试剂盒 FISH glycogen synthase kinase 3β ELISA Kit 12.5-400U/L 糖原合成酶激酶3β GSK3β
KKX-10581F 鱼三磷酸腺柠檬酸裂解酶(acly)elisa试剂盒 FISH ATP citrate lyase ELISA Kit 1.25-40mU/mL 三磷酸腺柠檬酸裂解酶 acly
KKX-10025F 鱼精胺(Spermine)elisa试剂盒 FISH Spermine ELISA Kit 10-320pmol/mL 精胺 Spermine
KKX-10696F 鱼紧密连接蛋白(Occludin)elisa试剂盒 FISH Occludin ELISA Kit 0.625-20ng/mL 紧密连接蛋白 Occludin
KKX-10601F 鱼辅酶A羧化酶(ACCase)elisa试剂盒 FISH Acetyl CoA carboxylase ELISA Kit 1.5-48U/L 辅酶A羧化酶 ACCase
KKX-10731F 鱼糖胺聚糖(GAG)elisa试剂盒 FISH glycosaminoglycan ELISA Kit 0.75-24ug/mL 糖胺聚糖 GAG
KKX-10146F 鱼肉碱脂酰转移酶(CPT)elisa试剂盒 FISH Carnitine palmitoyltransferase ELISA Kit 15-480U/L 肉碱脂酰转移酶 CPT
KKX-10417F 鱼白细胞介素12(IL-12)elisa试剂盒 FISH Interleukin 12 ELISA Kit 6.25-200pg/mL 白细胞介素12 IL-12
KKX-10546F 鱼硫酸硫转移酶(TST)elisa试剂盒 FISH thiosulfate sulfurtransferase ELISA Kit 6.25-200U/L 硫酸硫转移酶 TST
KKX-10446F 鱼蛋白激酶C(PKC)elisa试剂盒 FISH protein kinase C ELISA Kit 62.5-2000pg/mL 蛋白激酶C PKC