卡凯希生物的人尿苷二磷酸 (UDP) ELISA试剂盒产品概述

卡凯希生物的人尿苷二磷酸 (UDP) ELISA试剂盒是一种高灵敏度、高特异性的酶联免疫吸附测定试剂盒，专门用于定量检测人血清、血浆和其他生物样本中尿苷二磷酸 (UDP) 的含量。

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。将预先包被尿苷二磷酸（UDP）抗体的微孔中，依次加入标本、标准品和HRP标记的检测抗体，经过温育和洗涤后，用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下变成蓝色，再在酸的作用下变成黄色。颜色的深浅与样品中的UDP浓度成正比。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清：
   • 使用不含热原和内毒素的试管。
   • 避免细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟分离血清。
2. 血浆：
   • 选择EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
   • 3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：
   • 3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：
   • 加入适量生理盐水捣碎。
   • 3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：
   • 如果不及时检测，按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融。
   • 在室温下解冻并确保样品均匀。

自备物品

1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱

操作注意事项

1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
2. 从冰箱取出的浓缩洗涤液如有结晶，水浴加热使其完全溶解。
3. 不用的板条立即放回自封袋中，密封保存。
4. 浓度为0的S0号标准品可视为阴性对照或空白。
5. 样本已稀释5倍，最终结果乘以5才是实际浓度。
6. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
7. 所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成

试剂的准备

• 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1:20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

洗板方法

1. 手工洗板：
   • 甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1分钟，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，重复5次。
2. 自动洗板机：
   • 每孔注入350μL洗涤液，浸泡1分钟，洗板5次。

操作步骤

1. 从室温平衡20分钟的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。
3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入HRP标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃温育60分钟。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1分钟，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，重复5次。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15分钟。
7. 每孔加入终止液50μL，15分钟内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果判断

• 绘制标准曲线：在Excel中，以标准品浓度为横坐标，对应OD值为纵坐标，绘制线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

试剂盒性能

1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值大于等于0.9900。
2. 灵敏度： 检测浓度小于1.0 ng/L。
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月

免责声明

1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。