猴胆碱(ACH)elisa检测试剂盒
使用说明书
检测原理:
猴胆碱(ACH)elisa检测试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被微囊藻毒素LR(MC-LR)抗体的包被微孔中,依次
加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻-底洗涤。用底物TMB显色,TMB在化物酶的催化下转化成蓝
色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的微囊藻毒素LR(MC-LR)呈正相关。用酶标仪在450m波长
下测定吸光度(0D值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1.样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根化物酶(HRP)的剂。
2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行。
3.植物萃取液或其它相关样本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测。
4.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分
解冻。
自备物品:
仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 μL、20μL、200 μL、1000 μL)。
耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸酯(DEPC)水处理的离心管、吸头(10 μL、200 μL、1000 μL)、双蒸水。
操作注意事项:
1. - 收集样本,通常是血液样本,离心分离血清或血浆。
- 根据试剂盒说明,可能需要对样本进行稀释或特殊处理。
2. - 根据试剂盒提供的浓度梯度稀释标准溶液。
3. - 微孔板预先包被有特抗体,用于捕获1,25(OH)2D3。
4. - 在微孔板的孔中加载标准品、质控品和待测样本。
5. - 可能需要添加封闭剂以减少非特结合,然后在室温或37°C下孵育一段时间。
6. - 清洗微孔板以去除未结合的物质。
7. - 加入酶标记的抗体,该抗体能与1,25(OH)2D3结合。
8. - 让酶标记的抗体与1,25(OH)2D3结合。###
9. - 再次清洗微孔板以去除未结合的酶标记抗体。
10. - 加入底物溶液,底物在酶的作用下会变为可见的颜色。
11. - 允许颜色发展到稳定的程度,时间根据试剂盒说明确定。
12. - 加入终止液,停止颜色变化并稳定结果。
13. - 使用酶标仪在特定波长(通常450nm,有时405nm或630nm)下读取吸光度。
14. - 根据标准曲线计算样品中1,25(OH)2D3的浓度。
试剂的准备:
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法:
1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1mi后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2.自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步紧:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加人辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴
锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1in,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50uL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的0D值。
结果判断
绘制标准曲线:在Ec工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应0D值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算
各样本浓度值。
试剂盒性能:
1.抗体优势----、灵敏、特异
2.规范包被操作----吸附均匀,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3.先进的优化方案----重复性高,可靠性强
4.购买本公司的ELISA试剂盒,免费代测
5.技术服务要求:专业,规范,
6.适用于体液、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本
7.可检测动物类型丰富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黄金地鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、山羊、鹅、鸡、虾、河蟹、鲈鱼、斑马鱼等
8.可检测指标齐全:因子、生成素、因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等
9.经济、实惠、可靠,完善、稳定的实验体系,的科研队伍,先进的实验设备、准确可靠的实验结果
安全性
1)避免直接接触停止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请赶快用水冲刷。
2)实验中不要吃喝、抽烟或运用化妆品。
3)不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
**免责声明**
本ELISA试剂盒仅供科学研究使用,不适用于临床诊断或决策。用户在使用本产品时应具备相关的实验技能和知识,。在开始实验前,请仔细阅读并理解产品说明书和此免责声明。
相关产品推荐:
KKX-58532M 小鼠α1微球蛋白(AMG)elisa试剂盒 Mouse alpha-1-microglobulin elisa kit AMG
KKX-59426M 小鼠蛋白激酶R-A(PKR-A)elisa试剂盒 Mouse PKR-A elisa kit PKR-A
KKX-46814Z 植物半醛脱氢酶(SADH)elisa试剂盒 Plant semialdehyde dehydrogenase elisa Kit
KKX-46357Z 植物T4多聚核苷酸激酶(T4PNK)elisa试剂盒 Plant T4 polynucleotide kinase elisa Kit
KKX-59287M 小鼠金属蛋白酶组织因子2(TIMP-2)elisa试剂盒 Mouse Tissue inhibitor of metalloproteinase2 elisa kit TIMP-2
KKX-57724M 小鼠基质相互作用分子2(STIM2)elisa试剂盒 Mouse Stromal interaction molecule 2 elisa kit STIM2
KKX-56603M 小鼠白细胞介素5(IL-5)elisa试剂盒 Mouse Interleukin 5 elisa kit IL-5
KKX-46837Z 植物a脂肪酸氧化酶 (a-FAO)elisa试剂盒 Plant a-Fatty acid oxidase elisa Kit
KKX-46884Z 植物异黄酮(Isoflone)elisa试剂盒 Plant Isoflone elisa Kit
KKX-56811M 小鼠甲胎蛋白(AFP)elisa试剂盒 Mouse Alpha-fetoprotein elisa kit AFP
KKX-46452Z 植物赤霉素20氧化酶(GA20ox)elisa试剂盒 Plant GA20oxidases elisa Kit
KKX-59348M 小鼠Fission 1蛋白(FIS1)elisa试剂盒 Mouse Fission 1 elisa kit FIS1
KKX-58492M 小鼠趋化因子4(CXCL4)elisa试剂盒 Mouse chemokines 4 elisa kit CXCL4
KKX-46863Z 植物氰化高铁血红蛋白(HiCN)elisa试剂盒 Plant hemiglobincyanide elisa Kit
KKX-58938M 小鼠STEAP家族成员1抗体(Steap1-Ab)elisa试剂盒 Mouse STEAP family member 1 antibody elisa kit Steap1-Ab
KKX-57762M 小鼠补体片段2b(C2b)elisa试剂盒 Mouse Complement fragment 2b elisa kit C2b
KKX-57345M 小鼠(CYP4F2)elisa试剂盒 Mouse CYP4F2 elisa kit CYP4F2
KKX-59111M 小鼠 受体相关蛋白1(LRP-1)elisa试剂盒 Mouse low-density lipoprotein-receptor-related protein 1 elisa kit LRP-1
KKX-46071Z 植物酪氨酸(Tyr)elisa试剂盒 Plant Tyrosine elisa Kit
KKX-101s229 裸鼠雌二醇(E2)elisa试剂盒 Estradiol