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牛奶磷酸酶(phosphatase)elisa检测试剂盒
产品名称：牛奶磷酸酶(phosphatase)elisa检测试剂盒 ； vitaminD3
产品系列号：KKX-71316T
品牌：卡凯希
产品规格：96T/48T
使用范围：仅供科研范围内使用
保质期：6个月
保存条件：避光/低温保存
牛奶磷酸酶(phosphatase)elisa检测试剂盒的注意事项：
1、严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-2℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2、洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3、消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4、底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5、避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6、在储存和温育时避免强光直接照射。
7、平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8、任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9、不能使用过期产品。
10、如果可能传播，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。
操作步聚：
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
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