实验注意事项:
夹心法,一般的操作步骤为:
将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体;
加入待测检体,检体中若含有待测的抗原,则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结;
洗去多余待测检体,加入另一种对抗原专一的一次抗体,与待测抗原进行键结;
洗去多余未键结一次抗体,加入带有酶的二次抗体,与一次抗体键结;
洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或仪器读取呈色结果;
间接法,一般的操作步骤为:
将已知的抗原固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余的抗原。
加入待测检体,检体中若含有待测的一次抗体,则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结。
洗去多余待测检体,加入带有酶的二次抗体,与待测的一次抗体键结。
洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酶呈色,藉仪器测定塑胶盘中的吸光值,以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。
竞争法,其操作步骤为:
将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体
加入待测检体,使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结
加入带有酶的抗原,此抗原也可与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结,由于塑胶孔盘上固著的抗体数量有限,因此当检体中抗原的量越多,则带有酶的抗原可键结的固著抗体就越少,亦即,两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上抗体键结,即所谓竞争法之由来。
- 长期保存：对于长期存储，-80°C是选择。避免反复冻融，因为这可能导致样本的损失或变性。
4. 标准化：所有样本应在相同条件下收集和处理，以确保结果的可比性。
5. 样品稀释：根据ELISA试剂盒的说明，可能需要对血清或尿液样本进行适当的稀释，以确保检测范围内的浓度。
6. 记录：在收集样本时，记录样本信息，包括患者ID、收集时间、样本类型等，以便后续数据分析。
7. 操作前准备：在进行ELISA之前，确保样本已经充分解冻并混合均匀，避免形成沉淀。
请注意，这是通用指导，每个ELISA试剂盒都有自己的具体操作指南，因此在实验前应详细阅读并遵循指南。不同类型的ELISA（直接法、间接法、竞争法、夹心法等）可能会有所不同，务必按照您购买的试剂盒的说明书进行操作。如与英文说明书有异,请以英文说明书为准。
**免责声明**
本ELISA试剂盒仅供科学研究使用，不适用于临床诊断或决策。用户在使用本产品时应具备相关的实验技能和知识，。在开始实验前，请仔细阅读并理解产品说明书和此免责声明。
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