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小鼠核转录因子κB蛋白(I-kB)elisa试剂盒
产品名称:小鼠核转录因子κB蛋白(I-kB)elisa试剂盒 ; MouseChemokineC-X-C-MotifReceptor3elisakit
产品系列号:KKX-58168M
品牌:卡凯希
产品规格:96T/48T
使用范围:仅供科研范围内使用
保质期:6个月
保存条件:避光/低温保存
小鼠核转录因子κB蛋白(I-kB)elisa试剂盒的注意事项:
1、严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-2℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2、洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3、消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4、底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5、避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6、在储存和温育时避免强光直接照射。
7、平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8、任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9、不能使用过期产品。
10、如果可能传播,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
操作步聚:
夹心法,一般的操作步骤为:
将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体;
加入待测检体,检体中若含有待测的抗原,则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结;
洗去多余待测检体,加入另一种对抗原专一的一次抗体,与待测抗原进行键结;
洗去多余未键结一次抗体,加入带有酶的二次抗体,与一次抗体键结;
洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或仪器读取呈色结果;
间接法,一般的操作步骤为:
将已知的抗原固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余的抗原。
加入待测检体,检体中若含有待测的一次抗体,则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结。
洗去多余待测检体,加入带有酶的二次抗体,与待测的一次抗体键结。
洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酶呈色,藉仪器测定塑胶盘中的吸光值,以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。
竞争法,其操作步骤为:
将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体
加入待测检体,使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结
加入带有酶的抗原,此抗原也可与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结,由于塑胶孔盘上固著的抗体数量有限,因此当检体中抗原的量越多,则带有酶的抗原可键结的固著抗体就越少,亦即,两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上抗体键结,即所谓竞争法之由来。
- 长期保存:对于长期存储,-80°C是选择。避免反复冻融,因为这可能导致样本的损失或变性。
4. 标准化:所有样本应在相同条件下收集和处理,以确保结果的可比性。
5. 样品稀释:根据ELISA试剂盒的说明,可能需要对血清或尿液样本进行适当的稀释,以确保检测范围内的浓度。
6. 记录:在收集样本时,记录样本信息,包括患者ID、收集时间、样本类型等,以便后续数据分析。
7. 操作前准备:在进行ELISA之前,确保样本已经充分解冻并混合均匀,避免形成沉淀。
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