试剂配制:

1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。

2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。

3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5、辣根化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-idin Diluent):1×10ml/瓶。

6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)

7、辣根化物酶标记亲和素(HRP-idin):1×120μl/瓶(1:100)

8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

试剂准备:

1. 小鼠中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)elisa试剂盒使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。

2. 标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成不同的梯度, 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

3. 浓洗涤液:用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。

优点:

安全性
1)避免直接接触停止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请赶快用水冲刷。
2)实验中不要吃喝、抽烟或运用化妆品。
3)不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
1.准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2.灵敏度：最-低检测浓度小于1.0ng儿。
3.特：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6.有效期：6个月

1. 样品准备：收集血液样本，离心分离血清或血浆，并按照试剂盒的说明进行适当的稀释或处理。
2. 标准曲线建立：使用试剂盒提供的标准品，按照的浓度梯度进行稀释，以建立吸光度与浓度的关系曲线。
3. 预处理：可能需要对样品进行预处理，例如去除蛋白质或去除其他可能干扰检测的成分。
4. 样品和标准品加载：将样品和标准品加载到预包被有抗体的微孔板中。
5. 孵育：在一定温度和时间下让样本和抗体结合。
6. 洗涤：使用洗板机或手动清洗微孔板，去除未结合的物质。
7. 添加酶标记的抗体：加入标记了酶的抗体，使其与步结合的抗原结合。
8. 再次孵育：允许酶标记的抗体与抗原结合。
9. 洗涤：再次清洗微孔板以去除未结合的酶标记抗体。
10. 添加底物溶液：加入底物，底物在酶的作用下会发生颜色变化。
11. 孵育：让反应进行到一定时间，颜色变化达到稳定。
12. 终止反应：加入终止液，停止颜色变化。
13. 读取吸光度：使用酶标仪或微孔板读取器在波长下测量每个孔的吸光度。
14. 数据分析：根据标准曲线计算ucOC的浓度。

小鼠中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)elisa试剂盒服务承诺：

一、产品质量保证,有问题免费包换；

二、提供免费代测服务(为客户提供来样检测服务,限度实验结果的有效性)；

三、提供全程技术指导。

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